|
Resúmen
El propósito de este
estudio fue comprobar el efecto de la radiación
láser de baja potencia infrarrojo en
el proceso de reparación epitelial, utilizando
una potencia de 35 mW con una sola aplicación
durante 1 minuto, para lo cual se utilizó
12 cobayos a los cuales se les realizo dos heridas
de 3.5mm de diámetro a ambos lados en
la región dorsal, tomando como referencia
la columna vertebral, se utilizó el equipo
Twin Láser infrarrojo (AsGaAl) con una
longitud de onda de 780nm siguiendo un protocolo
de exposición. De ellos se obtuvieron
un total de 24 muestras, 12 de las muestras
fueron evaluadas al 3er día, siendo 6
para el grupo irradiado con láser de
baja potencia infrarrojo y un grupo no irradiado.
De igual manera se procedió al 7mo día.
Las láminas histológicas
se realizaron con las coloraciones de H.E. y
Tricrómica de Masson.
La interpretación
de los resultados fue hecha a través
de la prueba no paramétrica de MANN-WHITNEY,
se encontró diferencias estadística
significativas (p<0.05) para las siguientes
células observadas: tumefactas, hematíes,
plasma, respuesta inflamatoria, tejido de granulación
al 3er día de lo que se concluye que
el láser infrarrojo de baja potencia
puede acelerar la reparación epitelial
al 3er día. No se encontró diferencias
estadísticas al 7mo día.
Palabras claves: Láser
de baja potencia / Reparación.
Introducción
La historia Odontológica,
siempre ha tratado de buscar procedimientos
que nos permitan minimizar el dolor, estimular
la reparación y reducir los edemas, con
la consecuente acción antiinflamatoria
y la bioestimulación celular, este hecho
hace que los científicos investigen día
tras día tratando de descubrir algo que,
de cierto modo pudiese actuar en el órgano,
tejido o célula sin causar efectos secundarios
dañinos a los tejidos vecinos.
Actualmente disponemos de
varios medios que tratan de ofrecer a nuestros
pacientes un mejor tratamiento post-operatorio.
Uno de estos instrumentos es el láser
de baja potencia que por sus propiedades al
interactuar con los tejidos biológicos
blandos y duros, nos ofrecen efectos terapéuticos
como analgésico, antiinflamatorio y bioestimuladores
sobre los tejidos vivos, logrando a nivel celular
importantes cambios para una rápida respuesta
del tejido dañado.
Esta densidad de energía
baja no induce cambios en la temperatura de
los tejidos a diferencia de los sistemas láser
de alta potencia o quirúrgicos que pueden
hasta vaporizar los componentes de los tejidos.
Los láser de baja potencia han sido aplicados
a un amplio rango de efectos biológicos,
como en el incremento de la proliferación
epitelial y de fibroblastos, estimular la síntesis
de colágeno y actividad fagocitaria,
así como producir el movimiento de Beta
endorfinas.
El objetivo del trabajo
de investigación fue evaluar y comparar
histopatológicamente la presencia y tipo
de proceso inflamatorio y la reparación
en los especimenes que serian irradiados con
láser de baja potencia infrarrojo y no
irradiados (grupo control) al 3er día
y al 7mo día.
Materiales y Métodos
El presente estudio fue
un trabajo experimental donde se utilizaron
12 especimenes de Cavia porcellus (cobayos)
que bajo la supervisión del médico
veterinario responsable y de acuerdo a los criterios
de inclusión fueron seleccionados (machos,
2.5 meses de edad, 350 gr de peso) los cuales
se mantuvieron en jaulas separadas con alimento
balanceado.
Se procedió a la
ejecución dividiendo el trabajo de investigación
en fases:
Fase Pre quirúrgica:
Se registraron en una ficha de trabajo individual
los 12 especimenes de Cavia porcellus para codificarlos.
Se anestesió con Sulfato de ketamina
0.3 mililitros a cada cobayo, se realizó
el depilamiento con hoja de afeitar y espuma
de jabón en la parte dorsal del cobayo,
delimitando nuestro campo operatorio teniendo
como referencia a 6 cm de los miembros superiores
a ambos lados de la columna vertebral y a 4cm
del nervio lumbar que se encuentra aproximadamente
a ½ cm de la columna vertebral obteniendo
un punto. Fig.1
Fig 1.Puntos de referencia para la incisión
quirúrgica
Fase quirúrgica:
Posteriormente desde este punto se confecciono
el área quirúrgica tomando 3 cm
para la derecha e izquierda del animal (ancho)
y a 2 cm hacia arriba y hacia abajo del espécimen
(largo) formando un rectángulo a ambos
lados de la columna vertebral. Fig 1
Se desinfectó con
alcohol yodado el campo operatorio, realizándose
dos heridas idénticas con un sacabocado
(punch) de 3.5 mm de diámetro bilateralmente
en el área ya mencionada. Fig.2
Fig 2. Incisión con el bisturí
circular
Aleatoriamente se eligió una herida en
cada cobayo a la cual se aplicó inmediatamente
láser de baja potencia infrarrojo y la
otra herida no irradiada sirvió como
control, tanto en el grupo láser como
el grupo control estuvo conformado por 12 heridas
cada uno, registrados en las fichas de trabajo
individual para cada espécimen. La técnica
de aplicación del láser fue de
barrido en la herida, potencia de 35 mW, durante
1 minuto con una densidad de energía
(6 J/cm2), una sola exposición al láser
da baja potencia después de haberse realizado
las heridas en grupos a los cuales se les aplicó
el láser. Fig 3
Fig 3. Realización
de las heridas
Fase post-quirúrgica:
Al 3er y 7mo día se sacrificaron 6 cobayos
para la obtención las muestras histopatológicas,
se cortó el área quirúrgica
con un bisturí # 15 para cada muestra,
tanto para el grupo control como grupo láser,
las muestras fueron codificadas de acuerdo a
los diferentes tratamientos e inmediatamente
colocados en formol al 10% por 48 horas.Fig.
4
Fig 4. Obtención de las muestras
Después de la obtención de las
láminas histológicas se coordino
con el departamento de Ciencias Básicas
de Odontología de la Universidad Nacional
Mayor de San Marcos para la realización
de las lecturas en el servicio de Anatomía
Patológica de la Facultad de Odontología
U.N.M.S.M . Fig5, 6, 7
Fig 5OLÁSER AL 3er. DÍA : TRICRÓMICA
DE MASSON (40X)
Fig. 6 LASER AL 3er. DÍA:
TRICROMICA DE MASSON (10X)
Fig 7 . LASER al 7 mo DIA :TRICROMICA DE MASSON
(10x)
En todo el campo se observan entre delicadas
fibras colágenas
en azul en reciente formación entre elementos
inflamatorios redondos
correspondientes a linfocitos,.
Por debajo se aprecia el tejido de granulación
que se proyecta
hacia abajo donde es posible ver pequeño
cavidades vasculares
y redondeados elementos inflamatorios histiocitos
y delicados fibras
pre-colágenas como finos filamentos azules,
propios del tejido reparativo inicial.
En la zona inferior se ve aprecia un anillo
de reepitelización
scaso de color rosado que entra cubriéndolo
el cráter quirúrgico
el cual ha sido rellenado insensiblemente por
tejido colágeno joven
débilmente en azul y porciones de color
rojo células con capilares
neoformados.
Los datos de la evaluación
histopatológica fueron elevados a tablas
de porcentaje para luego ser analizados por
la prueba estadística no paramétrica
con el método de MANN-WHITNEY para valorar
la reparación epitelial al tercer día
y séptimo día, en el grupos irradiados
con láser de baja potencia infrarrojo
de baja potencia y control.
a) Se evaluaron en los grupos
irradiados con láser de baja potencia
infrarrojo y no (grupo control) al tercer día
la presencia de :
Células fragmentadas,
células tumefactas, plasma, hematíes,
respuesta inflamatoria, tejido de granulación.
b) Se evaluaron en los grupos
irradiados con láser de baja potencia
infrarrojo y no (grupo control) al séptimo
día la presencia de :
- Células fragmentadas,
células tumefactas, plasma, tejido de
granulación, reepitelización
Resultados
.................................................................................
El presente estudio tuvo
un total de 24 muestras las cuales fueron divididas
en 12 muestras para el 3er día (partidas
en 6 muestras control y 6 con aplicación
láser) y 12 al 7mo día (partidas
en 6 muestras control y 6 con aplicación
láser).
Discusión
Una forma de ayudar a la
estimulación de la reparación
del tejido dañado seria la utilización
de láser de baja potencia infrarrojo
que tiene efectos terapéuticos como lo
menciona SILVIERA6, el presente trabajo ratifica
un aumento estadísticamente significativo
en la reparación del tejido dañando
al 3 er día, así como una disminución
en el proceso inflamatorio en los grupos irradiados
con láser de baja potencia infrarrojo,
también GARRIGO y col5 afirman que la
aplicación del láser de baja potencia
determina un incremento en el proceso de reparación,
su acción se basa en la multiplicación
celular, la formación de fibras colágenas
y elástica, la regeneración de
vasos, la reepitelización del tejido
dañando. Esto explica porque en nuestro
trabajo se pudo observar un aumento en plasma
y tejido de granulación a comparación
del grupo control, lo que implica una reparación
del tejido dañado. Así como, al
7mo. día se pudo observar una mayor organización
en el tejido de granulación en los grupos
irradiados con láser de baja potencia
infrarrojo y no (grupo control).
SKINNER y col.9 realizó
estudios experimentales en cultivo de células,
describe que cuando se irradian con láser
de baja potencia en pequeñas dosis ,
se estimula la proliferación celular,
afirmando que la eficacia clínica del
láser puede estar relacionado con el
aumento de reparación del tejido conectivo,
resultado que coincide con KATADA y col.7 quien
investigó el efecto del láser
de baja potencia en fibroblastos humanos, los
resultados obtenidos, sugirieron que el láser
estimula la proliferación de fibroblastos
humanos. En esta investigación mediante
la observación microscopia se pudo determinar
un aumento en el número de fibras colágenas
en los especimenes irradiados con láser
infrarrojo de baja potencia, este trabajo puede
extrapolarse mediante un trabajo clínico,
lo cual podría estar respaldado por otras
investigaciones que se han mencionado produciendo
resultado favorables en cuanto a la proliferación
de fibras colágenas.
SILVEIRA8 realizó
un experimento en el cual se utilizó
un láser de Ga- As produciendo heridas
en el dorso del animal las variables que observaron
fueron la degranulación de mastocitos,
área de vasodilatación, proliferación
fibro- blástica y un aumento de sustancia
fundamental en los heridas irradiadas con láser
de baja potencia en comparación al grupo
control. Estos al ser comparados con los resultados
obtenidos concuerdan con un aumento en la proliferación
fibroblastica en comparación a los grupos
no irradiados al ser comparados con nuestros
resultados se observa una coincidencia del aumento
de la reparación fibroblastica en comparación
a los grupos no irradiados ya que nosotros hemos
considerado células fragmentadas, células
tumefactas, plasma, hematíes, respuesta
inflamatoria, tejido de granulación,
pudiendo encontrar al final el mismo resultado.
ANNEROTH y col1 evaluaron
el efecto del láser de baja potencia
en el tratamiento de curación de heridas
en ratones láser infrarrojo de Ga-As
los resultados histológicos no confirmaron
que el uso del láser de baja potencia
pudiera mejorar el proceso de curación
de heridas, pero la potencia utilizada fue de
0.5mW a comparación con nuestro trabajo
que fue de 35mw en donde obtuvimos diferencias
estadísticas significativas por lo que
se opina que la dosis que se empleo en el anterior
trabajo no fue suficiente para la estimulación
de los procesos metabólicos intracelular
.
Otro investigador, HALL
y col6 realizo un trabajo en el cual utilizaron
38 ratas a las que se les realizo heridas en
el área caudal, se les aplico láser
de baja potencia infrarrojo y no mostraron diferencias
significativas en el proceso de curación
de heridas. Pero a diferencia de ellos nosotros
hemos podido comprobar un incremento en la formación
de coágulo plasma tanto en el tejido
de reparación por debajo de la heridas
en las muestras irradiadas como un aumento del
tejido de granulación en comparación
a los grupos control al tercer día y
una disminución del proceso inflamatorio.
De acuerdo a los que se
ha encontrado se puede suponer que el láser
al tercer día tubo una influencia en
la reparación del tejido dañado
a diferencia del grupo no irradiado (control).
Conclusiones
De acuerdo con la metodología
empleada y frente a los resultados encontrados
, podemos concluir:
1.- En nuestra investigación
se encontró un mayor porcentaje de reparación
epitelial en los cobayos irradiados con láser
de baja potencia infrarrojo comparándolos
histológicamente con el grupo control
al 3er día.
2.- Al tercer día
se pudo observar diferencias significativas
en los grupos láser y control, a la presencia
células tumefactas, hematíes,
plasma, respuesta inflamatoria, tejido de granulación.
3.- Al séptimo día
no se observó diferencias significativas
en el grupo láser ni control pero debemos
tomar en cuenta que el tejido de granulación
presentaba mejor organización en el grupo
láser de baja potencia infrarrojo.
4.- El uso del láser
de baja potencia infrarrojo parece tener beneficios
en la regeneración epitelial lo que favorece
un beneficio en la recuperación del tejido
dañado
Referencias Bibliográficas
1.- ANNEROTH G, HALL G,
RYDÉN AND L, ZETTEROQVIST The effect
of low-energy infra-red laser radiation on wound
helaling in rats. British Journal of Oral and
Maxillofacial Surgery v.26 p. 12-17. 1998
2.- BENEDICENTI A, GOLA
G, CINGANO L, LUPI L.
Neuralgia do trigêmeo: Avaliaçâo
radioimunológica do nivel de beta endorfina
no líquido céfalo-raquídeo
antes e depois de irradiaçâo com
luz laser 904nm Laser em cirurgia e terapia
v.1 n.1 p.3-9. 1987
3.-COLLS GRUAÑAS
J La terapia Láser Hoy 2da Edición
Editorial Centro Documentación Láser
de Meditec S.A pp.36-70 España 1986.
4.-DONATO A y BORAKS S Laser
clínico aplicac?es práticas em
odontoestomatologia Primero Edición Editorial
Robe Brasil 158p. 1993
5.-GARRIGO M y VALIENTE
C. Efectos biológicos de la radiación
láser de baja potencia en la reparación
histica. Rev. Cubana Estomatol. v.33 p. 2 1996
6.-HALL GUNNAR, ANNEROTH
G, SCHENNINGS T, ZETTERQVIST L, RYDÉN
H Efect of low level energy laser irradiation
on wound on healing an experimental study in
rats Swed dent v.18 p.29-34 1994
7.-KATADA H, MIIYAJIMA K,
YOSHIDA K, KAMIYA K, SENDA A, IIZUKA T, HARA
G A study
8.-SILVEIRA J; LOPES E Alguns
aspectos do comportamento do mastócito
sob ação do raio laser de Ga As
- 904nm Arq. Cent. Estud. Curso Odontol v.28
n.1/2 p.73-96 1991.
9.-SKINNER S.M; GAGE J.P;
WILCE P.A ; SHAW R. M A preliminary study of
the effects of laser radiation on collagen metabolism
in cell culture Australian Dental Journal v.41
p.188-192 1996
Un especial agradecimiento
a:
Gutierrez Manay MD, por las lecturas histológicas.
Maritza Lira Cohaila MD, por su ayuda y asesoría
estadística.
Comunicación
con los Autores:
E-Mail: silvicabrera14@hotmail.com
laserjimenez@terra.com.pe
|
